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发明名称 -- 一种基因消除PCR的方法
发布时间:2014-07-01     点击次数:

发明名称 -- 一种基因消除PCR的方法

申请号­ CN201110382308
申请日 2011.11.25
公开(公告)号­ CN102604932B
公开(公告)日 2013.06.19
IPC分类号 C12N15/10
申请(专利权)人 华中农业大学;
发明人 桓娇娇;吕茹婧;张婷婷;程梦兰;董五辈;
优先权号  
优先权日  
申请人地址 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号;

摘要 [支持框选翻译]
 

本发明公开了一种基因消除PCR的方法,本项发明可以消除混合基因群体中的非目标基因。本项发明的技术要点是把非目标基因做成或人工合成短序列基因消除引物,把含目标基因的混合基因群体酶切加上带有一个碱基误配的限制性酶切位点及带有Poly(dA)的接头,经过纯化作为模板,在PCR反应中,通过基因消除引物与模板退火延伸恢复正确的酶切位点,然后用耐热的限制性酶酶切从而消除非目标基因的接头,使其无法得到扩增。以上反应是利用PCR仪做如下循环:94℃,30秒;60℃,40秒;75℃,8分钟,经过12至18个循环,富集目标基因,然后常规PCR进一步扩增目标基因。本发明高效快速,操作简便,成本低廉,可重复性高,分离效果好且假阳性率低。
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